分子生物学作业
一、填空
- DNA双螺旋直径为 (1) nm,每隔 (2) nm螺旋上升一圈。
- 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的 (3) 活性使之具有 (4) 功能,极大地提高了DNA复制的保真度。
- 两条互补的DNA链中,用作指导RNA合成的链被称为 (5) ,另一条链叫做 (6) 。
- DNA变性后,紫外吸收 (7) ,粘度 (8) 。
- 细菌的DNA连接酶以 (9) 为能量来源,而动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶则是以 (10) 为能源。
- 真核RNA聚合酶Ⅲ位于 (11) 中,负责 (12) 的合成。
- 在原核细胞翻译起始时,小亚基16S rRNA的3′-端与mRNA5′-端的 (13) 之间互补配对,确定读码框架,fMet- tRNAf占据核糖体的 (14) 位点。
- DNA变性后,浮力密度 (15) ,生物活性 (16) 。
- DNA复制时,连续合成的链称为 (17) _链;不连续合成的链称为 (18) 链。
- 真核RNA聚合酶Ⅱ位于 (19) 中,负责 (20) 的合成。
- 糖环上的1′C与碱基嘧啶上的 (21) 相连,与嘌呤上的 (22) 相连。
- DNA复制时,一条链是连续的,另一条链是不连续的,称为 (23) 复制;复制得到的子代分子,一条连来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种方式叫 (24) 复制。
- 原核生物RNA聚合酶核心酶的亚基组成为(25) 中, (26) 负责识别转录起点。
二、判断 - 地衣酚试剂可以使DNA变成蓝色,二苯胺试剂能使RNA变成绿色。
- DNA片断越大,复性速度越慢。
- DNA复制时,前导链和后随链是由同一个DNA聚合酶的两个活性中心催化合成的,合成方向均为5′→3′。
- 所有生物的嘧啶二聚体均可用光复活系统修复。
- 基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区。
- 大肠杆菌染色体DNA由两条链组成,其中一条链为模板链,另外一条链为编码链。
- 生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。
- 水分子可以插入天然DNA分子双螺旋的空隙中。
- 原核生物的DNA聚合酶Ⅰ主要负责切除冈崎片段的RNA引物,并用DNA链填补缺口。
- DNA损伤的错配修复系统一旦发现错配碱基,就会切除甲基化的链,并以未甲基化的链为模板进行修复合成。
- 大肠杆菌的所有基因转录都由同一种RNA聚合酶催化。
- 真核生物基因表达的效率比原核生物高,其转录产物不需要加工,即可作为模板用于指导蛋白质的合成。
- B-DNA是细胞内DNA的基本构象,在某些情况下还会有A型、Z型和三股螺旋的局部构象。
- 将凝胶上的RNA转移到硝基纤维薄膜上的技术叫Southern印迹法。
- DNA的两条链反向平行,复制时,两条新合成的链也按相反的方向延伸。
- 嘧啶二聚体可以通过重组修复被彻底去除。
- 真核生物的RNA聚合酶需要多种蛋白质因子协助,才能与转录起点结合。
- 原核生物转录生成的mRNA多数不需要加工,但rRNA是由初级转录产物加工而成的。
- 解开DNA的负超螺旋,会使双螺旋局部解开形成单链区。
- 将凝胶上的DNA转移到硝基纤维薄膜上的技术叫Southern印迹法。
- DNA聚合酶可以从头合成单链模板的互补链。
- 嘧啶二聚体指DNA两条链上的嘧啶共价连接而成的二聚体。
- 原核生物和真核生物的RNA聚合酶亚基组成差别很大,空间结构却很相似。
- 负责hnRNA剪接的剪接体是由多种蛋白质和多种snRNR构成的。
三、名词解释 - Southern印迹杂交 2. 聚合酶链式反应 3.移框突变(移码突变) 4. Tm 5. 内含子与外显子 6. Klenow片段7. 增色效应 8 分子杂交 9. 复制体1. 拓扑异构酶 10. Cot1/2 11. 单链结合蛋白
四、简答题和计算题 - 何谓核酸的变性?哪些因素可以影响Tm的大小。
- DNA复制的精确性、持续性和协同性是通过怎样的机制实现的?
- 某哺乳动物的细胞中,每个细胞的DNA长,细胞生长周期中的S期约为5小时,如果这种细胞DNA延长的速度与E.coli相同,即16 μm/min,那么染色体复制时需要有多少复制叉同时运转?
- 如果下面的DNA双链从右向左进行转录。(1) 哪条是有意义链?(2) 产生什么样的mRNA顺序?(3)mRNA顺序和DNA的反意义链顺序之间的关系是怎样的?
5′A-T-T-C-G-C-A-G-G-C-T 3′ 链1
3′T-A-A-G-C-G-T-C-C-G-A 5′ 链2 - 如果人体有1014个细胞,每个体细胞的DNA含量为6.4 × 109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少?是太阳-地球之间距离(2.2 × )的多少倍?已知双链DNA每1000个核苷酸重1 × 10,求人体的DNA的总质量。
- 若使15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长三代,提取DNA,并用平衡沉降法测定DNA密度,其14N-DNA分子与14N-15N杂合DNA分子之比应为多少?
- 那些因素能引起DNA损伤?生物体有哪些修复机制?
- 一个基因如何产生多种不同类型的mRNA分子?
- 概述影响变性DNA复性速度的因素。
- 真核生物DNA聚合酶有哪几种?它们的主要功能是什么?
- 概述PCR的基本过程?
- 原核生物的启动子和真核生物的三类启动子各有何结构特点?
- 肽链合成后的加工修饰有哪些途径?
- 概述分子杂交的概念和应用领域。
- 已知DNA的序列为:
W: 5′-AGCTGGTCAATGAACTGGCGTTAACGTTAAACGTTTCCCAG-3′
C: 3′-TCGACCAGTTACTTGACCGCAATTGCAATTTGCAAAGGGTC-5′ →
上链和下链分别用W和C表示,箭头表明DNA复制时复制叉移动的方向。试问:(1)哪条链是合成滞后链的模板?(2)试管中存在单链W,要合成新的C链,需要加入哪些成分?(3)如果需要合成的C链被32P标记,核苷三磷酸中的哪一个磷酸基团应带有32P? (4) 如果箭头表明DNA的转录方向,哪一条链是合成RNA的模板? - DNA和RNA各有几种合成方式,各由什么酶催化新链的合成?
- 真核生物基因转录的调控因子有哪些重要的结构模体?
- (1)不考虑合成氨基酸、mRNA、tRNA或核糖体所需的能量,计算合成由600个氨基酸残基组成的大肠杆菌某蛋白需水解多少个磷酸酐键?(2)蛋白质的合成为什么需要消耗这样多的自由能?