在做细胞转染实验时,经常会有这样的疑问,我们应该选择PEI转染试剂还是脂质体转染试剂?PEI转染试剂哪个品牌好用?在了解这个问题之前,我们先看看细胞转染的背景。
近年来,随着许多与疾病和细胞过程相关的基因被确定为治疗的潜在靶点,生物疗法已成为很多疾病的有效治疗方法。基因治疗与细胞治疗都属于生物疗法范畴。基因治疗是将转基因材料转移到患者的组织或细胞中,来达到纠正异常基因引起的特定疾病的目的。细胞治疗是指采用生物工程的方法获取具有特定功能的细胞,并通过体外扩增、特殊培养等处理后,使这些细胞具有增强免疫、杀死病原体和肿瘤细胞等功能,从而达到治疗某种疾病的目的。然而,如何实现高效的基因递送是开发生物疗法药物的关键限制因素之一。目前,病毒载体,例如慢病毒(LV)载体和腺相关病毒(AAV)等已成为生物疗法中常用的递送工具,已被证明拥有较高的安全性和高效的靶向递送力。
慢病毒可以将6 kb以内的基因永久整合到人源细胞系。第三代慢病毒生产通过四质粒共转来实现:一个包含目的基因的转移载体质粒(如pLenti-MP2)和三个包含不同慢病毒包装和包膜基因的质粒(如pMD2.G,pDMLg/pRRE,pRSV-Rev)。这些质粒被共转染到HEK293T细胞中,并在细胞培养过程中向培养基中释放转染慢病毒,进而收获慢病毒,此外,也可以通过慢病毒转染将目的基因永久整合到HEK293T或其他人源细胞系中。
重组腺相关病毒(rAAVs)是一种相对安全可靠的基因转移和稳定表达的工具。rAAV的生产通常采用三质粒共转染:一个含有目的基因的转基因质粒,两个含AAV包装基因的质粒。这些质粒被共转染到HEK293细胞后,将产生含有插入目的基因的感染性rAAV。转染几天后,rAAV可以从细胞中收获,纯化,将基因插入特定组织。
聚乙烯亚胺(PEI)转染是目前应用最广泛的rAAV质粒共转染HEK293细胞的方法之一。与钙介导的转染相比,PEI更可靠;与脂质体介导的转染相比,PEI具有更好的可扩展性和成本效益。已在众多研究文献种被证明是创建高传染性rAAV/LV的有效选择。那么,在实验过程中,PEI转染试剂哪个品牌好用?
美国Polysciences,它成立于1961年,产品被应用于各个科研领域。Polysciences在聚乙烯亚胺转染试剂(PEI转染试剂)的制造工艺上具有20多年的经验,其经典的PEI转染试剂产品系列包括研究级产品PEI 25K,PEI MAX和Transporter 5,以及cGMP级MAXgene GMP,被应用于抗体药物和重组蛋白,临床等级慢病毒和AAV病毒的规模化生产,为世界范围内客户提供成本效益更高、供应更稳定和质量更可靠的选择。