杂交瘤技术

噬菌体展示技术

兔单B细胞技术

原理

通过将兔子的B细胞与骨髓瘤细胞融合，产生杂交瘤细胞，从中分离出产生特异性抗体的细胞。

将兔子免疫的抗体基因与噬菌体基因融合，使噬菌体表面展示抗体片段，通过筛选获得与抗原结合能力较强的噬菌体。

通过免疫兔子产生抗体，然后从B细胞中分离、单克隆化，最终获得单一来源的抗体。

方法

包括免疫兔子、分离B细胞、融合、筛选杂交瘤细胞、单克隆化、抗体生产、纯化等步骤。

包括免疫兔子、提取RNA和制备cDNA、构建文库、融合噬菌体、展示筛选、单克隆化等步骤。

包括免疫兔子、收集B细胞、单克隆化、抗体生产宿主、抗体采集与纯化、验证与应用等步骤。

优点

已有较长历史，可用于多种动物源的抗体制备。

高通量、高效率，可用于快速筛选具有高结合亲和力的抗体片段。

直接从免疫兔子的B细胞中获取完整的单一来源抗体，特异性较高。

缺点

效率相对较低，兔子B细胞的抗体产量不高，存在免疫反应问题。

抗原的选择和筛选步骤可能影响抗体的特异性，不能直接得到完整的抗体。

传统方法效率较低，可能需要较长时间。

应用领域

主要用于生物医学研究和制备抗体用于实验室应用

广泛应用于抗体工程、抗体片段筛选、药物发现等领域

在生物医学研究、诊断工具和治疗药物研发等方面有广泛应用

技术改进

单细胞技术的发展提高了杂交瘤技术的效率

利用基因工程技术不断改进，增加抗体片段的多样性和结合亲和力。

引入单细胞技术，提高了效率和特异性