《现代生物技术》作业
一.名词解释
1.生物技术 2.愈伤组织 3.前体 4.cDNA文库
5.化学酶工程 6.酶分子修饰 7.连续培养 8.DNA芯片
9.细胞融合 10.基因工程载体 11.蛋白质工程 12微生物转化
13.人工种子 14.胚胎移植 15.初级代谢产物 16.动物克隆技术
17、限制性内切酶 18、细胞全能性 19、反馈抑制 20、酶工程 21、cDNA文库 22、生物技术
二. 选择题
1.胚胎干细胞属于（ ）
A．全能干细胞 B．多能干细胞 C．专一性干细胞 D．成体干细胞
2.工业化植物细胞培养系统主要包括两大类，它们分别是（ ）
A．毛状根细胞培养系统和表皮细胞培养系统 B．原代细胞培养系统和传代细胞培养系统
C．悬浮细胞培养系统和贴壁细胞培养系统 D．悬浮细胞培养系统和固定化细胞培养系统
3.某些放线菌产生的抗生素，是它们的（ ）
A．初级代谢产物 B．次级代谢产物 C．代谢中间产物 D．代谢废物
4.在某些PCR反应中必须使用简并引物，这是因为（ ）
A．设计的模板是蛋白质的一段肽链 B．简并引物合成较为方便
C．简并引物的退火温度较低 D．简并引物与模板杂交的效率最高
5.一个质粒含有四环素抗性基因（tetr）和LacZ基因，tetr内有HindⅢ位点，LacZ中有EcoRI位点。如用这两种切割载体一并连接入相应的外源片段，则带有该重组质粒的细胞将（ ）
A．有四环素抗性，在X-gal平板上呈现蓝色 B．对四环素敏感，在X-gal平板上呈现蓝色
C．有四环素抗性，在X-gal平板上呈现白色 D．对四环素敏感，在X-gal平板上呈现白色
6.在酶的纯化和精制过程中，根据酶分子电荷的性质进行分离的方法是（ ）
A．亲和层析 B．染料配体亲和层析 C．透析与超滤 D．层析聚焦
7.固定化酶的优点是（ ）
A．有利于增加酶的活性 B．有利于产物的纯化
C．有利于提高反应速度 D．有利于酶发挥作用
8.通过基因工程利用大肠杆菌生产胰岛素的过程中需要用的工具酶是（ ）
A．限制性内切酶.DNA连接酶 B．纤维素酶.果胶酶
C．胰蛋白酶.纤维素酶 D．胰蛋白酶.肠肽酶
9.通过对有关工艺参数的测定或测量，可以对发酵过程进行必要的控制。下列参数中属于间接参数的是（ ）
A．发酵液黏度 B．搅拌功率 C．呼吸商 D．溶解氧浓度
10.下列物质中不属于甜味剂的物质是（ ）
A．糖精 B．半乳糖 C．阿斯巴甜 D．天丙甲脂
11、“番茄马铃薯”杂种植株的生产要用到的生物技术是（ ）
①基因工程　②细胞工程　③发酵工程　④酶工程
A．①②③④ B．②④ C．③④ D．③②
12、被誉为中国“克隆先驱”的人是（ ）
A．童弟周 B．张涌 C．潘瑞炽 D．李继侗
13.以下哪些信息无法从cDNA克隆中获得 ( )
A. 外显子序列 B．启动子序列 C．序列的相似性 D．编码产物的氨基酸序列
14.DNA带电荷的性质如何，是什么赋予DNA这种电荷性质 ( )
A．正电性，来自磷酸根 B．正电性，来自碱基
C．负电性，来自磷酸根 D．负电性，来自碱基
15.确定人类疾病分子基础的最重要步骤是 ( )
A．将与疾病相关基因克隆并测序 B．进行核型分析，确定与疾病相关的染色体
C．分离患者的突变蛋白并制备抗体 D．研究患者的发病状态及与疾病发生的关系
16.血糖快速测定仪上的酶传感器中，使用的是（ ）
A．一般酶制剂 B．游离的酶 C．固定化酶 D．复合酶
17.泡菜制作属于下列哪种发酵类型（ ）
A．液体发酵 B．固体发酵 C．浅盘发酵 D．深层发酵
18.下列有关生物工程的叙述，不正确的是（ ）
19.在cDNA技术中，所形成的发夹环可用 ( )
A．限制性内切核酸酶切除 B．用3’外切核酸酶切除
C．用Sl核酸酶切除 D．用5’外切核酸酶切除
20.如何获取与人类疾病相关基因的功能信息 ( )
A．可通过GenBank上的信息，比较正常和异常基因的序列
B．分离该基因编码的蛋白质，在体外进行功能分析
C．突变该基因，然后检查疾病表型的表达
D. 使该基因表达，并测定没mRNA序列
21.“多莉”羊的核供体属于（ ）
A．生殖细胞 B．体细胞 C．胚胎干细胞 D．上皮细胞
22.在进行植物组织培养研究时，外植体的最小选取量是（ ）
A．约50000个细胞 B．约3000个细胞
C．约20000个细胞 D．约15000个细胞
23.关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确（ ）
A．具有可诱导性 B．具有可转移性
C．细菌生长的任何时期都可以出现 D．不同细菌出现感受态的比例是不同的
24.微生物对微量元素的需求极低，一般最低浓度为（ ）
A．1mg/mL B．0.1 mg/mL C．0.1μg/mL D．1μg/mL
25.酱油制作属于下列哪种发酵类型（ ）
A．液体发酵 B．固体发酵 C．浅盘发酵 D．深层发酵
26.下列物质中不属于甜味剂的是（ ）
A．糖精 B．半乳糖 C．阿斯巴甜 D．天丙甲脂
27.限制性内切核酸酶的星号活性是指（ ）
A．在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性。
B．活性大大提高
C．切割速度大大加快
D．识别序列与原来的完全不同
28.关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确（ ）
A．噬菌斑颜色变化 B．cI基因失活造成的噬菌斑的变化
C．对IPTG的分解能力 D．对X-gal的分解与否
29、关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确（ ）
A．具有可诱导性 B．具有可转移性
C．细菌生长的任何时期都可以出现
D．不同细菌出现感受态的比例是不同的
30、酶工程中酶来源的叙述，正确的是（ ）
A．酶都是直接从培养液中提取的 B．酶都是在细胞破碎后才能得到
C．酒精、丙酮可提取纯化蛋白质类酶 D．诱导酶可从培养液中提取
31、生产单克隆抗体要用到的生物工程技术是（ ）
①基因工程　②细胞工程　③发酵工程　④酶工程
A．①②③④ B．②③④ C．①②④ D．①③④
32、维持微生物正常生活不可缺少，但细胞自身无法合成的微量有机物是（ ）
A．生长因子 B．抗生素 C．维生素 D．辅酶
33、下列物质中，属于青霉素G前体的物质是（ ）
A．乙酸 B．苯乙酸 C．苯氧乙酸 D．丙酸
34、胚胎干细胞属于（ ）
A．全能干细胞 B．多能干细胞 C．专一性干细胞 D．成体干细胞
35、关于细胞工程的说法不正确的是 （ ）
A. 培养动物细胞和植物细胞的重要区别在于培养基的不同
B. 单克隆抗体与血清抗体相比，前者特异性强、灵敏度高，产量大
C. 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行，而植物细胞培养则需要在无菌条件下进行
D. 在生物体内细胞没有表现出全能性，与基因表达的选择性密切相关
36、能克服远缘杂交的不亲和性技术是（ ）
A．组织培养 B．细胞融合 C．动物胚胎移植 D．单倍体育种
37、某些放线菌产生的抗生素，是它们的（ ）
A．初级代谢产物 B．次级代谢产物 C．代谢中间产物 D．代谢废物
38、基因工程的单元操作顺序是（ ）
Ａ. 增，转，检，切，接 Ｂ. 切，接，转，增，检
Ｃ. 接，转，增，检，切 Ｄ. 检，切，接，增，转
Ｅ. 切，接，增，转，检
39、已获得了某种蛋白质的mRNA，通过利用这个mRNA分子获得目的基因，在下列获得目的基因的方法中，哪一种最可取（ ）
A．超速离心法 B．分子杂交法 C．逆转录酶法 D．合成法
40、蛋白质工程的战略是设计定做新型蛋白质，但其具体操作是在基因水平上进行的，这些操作技术包括基因定向突变及人工合成，其中 M13 法和 PCR 法定点突变的原理是（ ）
Ａ 在 DNA 聚合反应所需的引物中直接引入突变
Ｂ 在 DNA 聚合反应过程中通过碱基对错配引入突变
Ｃ 在 DNA 模板单链中用化学试剂诱导突变
Ｄ 在 DNA 连接反应过程中引入突变
Ｅ 化学修饰 DNA 体外复制产物
三.填空题
1.发酵工程的研究内容主要包括： . . 和 等。
2.根据构建克隆载体所用的DNA来源不同，基因克隆载体可分为 . .
和质粒DNA与染色体DNA片段组成的载体。
3.酶的制备流程一般包括 . . . . 和
这六个步骤，对某些纯度要求很高的酶则需经几种方法乃至多次反复处理。
4.根据分化潜能不同，可将干细胞分为 . . 。依据来源不同，可将其分为 和 。
5.制备原生质体的常用酶有 . . . 。
6.发酵中使用的水有 . 和 。
7.植物细胞工程实验室一般由 、 、 和 四部分组成。
8.农业生产研究中的三系育种体系包括： 、 和 。
9.动物细胞的培养基一般可分为 、 和 。
10. 和 是植物快速繁殖最常用的方法。
11.固定化酶和固定化细胞最通用的反应器是 和 。
12.蛋白质工程的基本任务是研究 与 的关系；对现有的蛋白质加以 、 ，构建生物学功能比天然蛋白质更加优良的新型蛋白质。
13.大多数工业用酶的合成受 和 的双重调节。
14.改变蛋白质结构的核心技术是 。
15.植物雄性不育从基因控制水平可分为 和 。
16.1972年，Berg首先实现了 ，标志着生物技术的核心技术—— 技术的开始。
17.发酵生产中的下游加工过程通常可分为 、 、 和 四个阶段。
18.大分子物质的精制依赖于 ，而小分子物质的精制则通过 完成。
19.基因工程工具酶就其用途主要可分为三大类： 、 、 。
20.在成品加工过程中，常用的干燥方法主要有 、 、 、 、 和 等方法。
21.连续发酵的方式有两种，一种为 ，另一种为 。
22.细胞固定化的主要方法有 和 。
23.微生物分批培养过程主要包括延滞期、 、 、 、 和衰亡期。
24.根据外植体的不同，植物组织培养可分为 、 、 等。
25、利用限制性内切酶酶切DNA的方法主要包括： 、 和 等。
26、发酵工程的研究内容主要包括： 、 、 和 等。
27、酶的发酵方式有两种：一种是 ，另一种是 。
28、蛋白质工程的基本任务是研究 与 的关系；对现有的蛋白质加以 、 ，构建生物学功能比天然蛋白质更加优良的新型蛋白质。
29、致癌农杆菌含有一种内源质粒，当农杆菌同植物接触时，这种质粒会引发植物产生肿瘤（冠瘿瘤），所以称此质粒为 ，它能进入植物细胞的部分约有25kb，称为 。
30、根据操作方式的不同，液体潜层发酵主要有 、 、 和 等三种类型。
31、在发酵过程的检测物理参数中， 、 、 、 、
和 是其中最为重要且需随时检测和控制的参数。
32、在设计基因工程菌种子扩大培养工艺时要注意结合分析具体菌的特性和质粒载体的结构研究既能保证 ，又能兼顾 的种子扩大工艺。
33、酶的生产方法可以分为 、 和 等三种。
34、微生物分批培养的过程包括延滞期、加速生长期、 、 、 和衰亡期。
35、酶分子经过金属离子置换修饰后，有利于阐明酶的催化作用机制，并有可能提高 、增加 或改变 。
四.判断题
1.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA分子。（ ）
2.动物细胞培养的最适pH为5.8～6.2之间，植物细胞培养的最适pH为7.2～7.4之间。（ ）
3.微细胞就是指形态极其微小的细胞，结构与正常细胞相同。（ ）
4.正十六烷可作为碳源发酵生产谷氨酸。（ ）
5.发酵液的摄氧率随菌浓增大而增大，但氧的传递速度随菌浓的对数关系减少。（ ）
6.细胞分裂素与生长素的比例调控着植物组织的形态发生与细胞分化，当比值高时产生芽，低时产生根，比值适中时可能维持原组织生长而不分化。（ ）
7.发酵液的摄氧率随菌浓增大而减少，但氧的传递速度随菌浓的对数关系减少。（ ）
8.利用低温保存技术可以永久保存珍贵品种或濒临灭绝的物种遗传资源。（ ）
9.核酶本身是一种蛋白质，可以特异性地催化某个反应，且能识别和剪切RNA的某个位点。（ ）
10.通过差示杂交后制备的cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的概率大为提高。（ ）
11.T4 DNA连接酶和E. coli连接酶都能催化平末端和粘末端的连接。（ ）
12.胞外酶和胞内酶都必须将细胞破碎后再进一步抽提。（ ）
13.在发酵过程中通常采用饱和蒸汽法对培养基进行灭菌，灭菌条件为1MPa维持20-30min。（ ）
14.寡糖添加剂也称为“益生素”。（ ）
15.成体干细胞中的造血干细胞属于多能干细胞。（ ）
16.原代培养是指将机体取出的细胞或组织进行实效培养的过程。（ ）
17.种子制备一般使用种子罐，扩大培养级数通常为四级。（ ）
18.外源基因（或DNA片段）插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。（ ）
19. 出发菌株在适当的方法和条件下进行诱变之后，子一代菌株即可用于后续的诱变选育出发菌株或用于目的产物的发酵实验。（ ）
20. 在进行植物细胞悬浮培养时，一般选择在静止期前进行继代培养，以获得尽量多的细胞产量。（ ）
21. 微生物工程的代谢产物可以分为三大类：初级代谢产物、次级代谢产物和最终代谢产物。其中，抗生素类物质属于初级代谢产物。（ ）
22、继代培养是指将机体取出的细胞或组织进行实效培养的过程。（ ）
23、目的基因、载体、受体细胞和工具酶称为基因工程的四大要素。（ ）
24、通过差示杂交后制备的cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的概率大为提高。（ ）
五.简答题
1.简要说明发酵技术的特点。
2.获得单倍体植株的方法有哪些？
3.限制性内切酶的识别特点和切割方式是什么？
4.简述提高酶产量的措施有哪些？
5.如何对由细胞融合得到的杂合细胞进行筛选？
6.发酵工业中的常用微生物有哪些？
7.现代生物技术是一项高技术，它具有高技术的“六高”特征是指哪些？
8.简述改变蛋白质的结构一般需要经过几个步骤。
9.简述植物组织培养的一般操作过程。
10.举例说明发酵技术都有哪些重要的应用？
11.简要说明获得目的基因的途径。
12.发酵培养基的基本组成有哪些，各有何作用？
13.简述染色体转移的常用手段。
14.酶固定化方法有哪些，各有何优缺点？
15、什么样的细胞可以作为受体细胞？
16、简要说明体外培养动物细胞的类型。
17、试述酶的主要生产方法。
18、理想的质粒载体须满足哪几个条件？
19、简要说明发酵的一般过程。
20、固定化细胞发酵产酶与游离细胞发酵产酶相比，具有哪些显著特点。
六.论述题
1.试述蛋白质工程与基因工程的关系。
2. 结合现代生物技术说明转基因食品的制备过程，并就转基因食品的安全性谈谈你的看法。
3. 什么是生物技术，它包括哪些基本的内容？它会对人类社会产生怎样的影响？
4. 试举例说明抗生素的发酵生产过程。
5.获得了一个新基因的克隆片段后，如何开展其功能研究。
6.试述在原核细胞中高效表达目的基因的基本策略有哪些？